Medio de disociación celular sin enzimas químicamente definido
CCM-RG-0049 es un medio de disociación celular químicamente definido y libre de origen animal para el desprendimiento sin enzimas de células adherentes en flujos de trabajo de investigación y bioprocesamiento. Este líquido de 100 mL, filtrado estéril, no contiene phenol red ni enzima digestiva, y está especificado a pH 7.0–7.4 con osmolalidad de 300–380 mOsmol/kg. Se suministra para equipos de compras que requieren composición definida, baja endotoxina y logística de cadena de frío controlada, con envío gratuito a todo el mundo disponible de CellCultureMedia.
- ✓ Envío mundial gratuito
- ✓ Fabricación alineada con ISO
- ✓ Certificado de análisis previa solicitud
- ✓ Cotización de volúmenes a granel y personalizados previa solicitud
Descripción general
Este medio de disociación celular químicamente definido es un reactivo líquido listo para usar para la liberación suave de células adherentes de recipientes de cultivo sin phenol red y sin actividad de enzimas digestivas. La formulación libre de origen animal está destinada a laboratorios y grupos de procesos que desean reducir los insumos de materias primas no definidas mientras mantienen una etapa de disociación controlada para el pase rutinario, la preparación celular y el apoyo al escalado. El producto se suministra como una botella de 100 mL bajo el SKU CCM-RG-0049, con un precio indicado de $219.44.
Las especificaciones clave de liberación incluyen formato líquido filtrado estéril, endotoxina ≤1 EU/mL, pH 7.0–7.4 y osmolalidad de 300–380 mOsmol/kg. El formato sin phenol red es útil cuando no se desea interferencia colorimétrica en mediciones posteriores o cuando los usuarios prefieren un fondo visual más limpio. Para buffers, suplementos y productos de disociación relacionados, revise nuestra categoría de reactivos de cultivo celular o contacte al equipo para consultar la disponibilidad de lotes y la documentación.
Aplicaciones
- Desprendimiento sin enzimas de células mamíferas adherentes durante el subcultivo rutinario cuando los usuarios necesitan un reactivo químicamente definido y libre de origen animal.
- Preparación de células para resiembra, expansión, recuento, preparación para citometría de flujo, flujos de trabajo de imagenología u otros ensayos de investigación donde se prefiera la manipulación sin phenol red.
- Estudios de desarrollo de procesos que comparan condiciones de disociación, tiempo de contacto, recuperación y morfología posterior a la liberación entre sistemas de reactivos definidos.
- Apoyo al bioprocesamiento para laboratorios que pasan de recipientes de cultivo pequeños a recipientes multicapa, sistemas agitados o formatos de manipulación cerrada, sujeto a calificación interna.
- Entornos de I+D académicos, biotecnológicos y biofarmacéuticos que requieren parámetros documentados de esterilidad, endotoxina, pH, osmolalidad, vida útil y cadena de frío para la revisión de compras.
Almacenamiento y manipulación
Almacene CCM-RG-0049 a 2–8 °C y proteja la botella de la exposición prolongada a temperatura ambiente cuando no esté en uso. El producto se envía en hielo azul para mantener un perfil logístico refrigerado y tiene una vida útil declarada de 24 meses cuando se almacena sin abrir bajo las condiciones recomendadas. Use técnica aséptica después de abrir, cierre el envase de inmediato y registre el seguimiento de la fecha de apertura según el procedimiento de su sitio. No congelar a menos que el usuario haya completado una evaluación interna de estabilidad. Antes de usar, equilibre solo el volumen requerido a la temperatura especificada en el protocolo validado de manipulación celular.
Calidad y documentación
CellCultureMedia suministra este reactivo de disociación para uso en investigación y bioprocesamiento con especificaciones listas para compras: formato filtrado estéril, clasificación libre de origen animal, límite de endotoxina de ≤1 EU/mL, pH 7.0–7.4, osmolalidad 300–380 mOsmol/kg y vida útil de 24 meses. Los controles de fabricación y liberación se gestionan bajo prácticas de calidad alineadas con ISO, con soporte documental disponible a través de nuestros recursos de calidad. Se puede proporcionar un Certificado de Análisis bajo solicitud para la revisión específica del lote. Para demanda prevista, pedidos de múltiples unidades o acuerdos de suministro permanente, use el formulario de solicitar cotización. El envío gratuito a todo el mundo está disponible, con envío refrigerado en hielo azul como condición estándar para este artículo.
Aspectos destacados de la formulación
No contiene (-)
[-]Phenol Red[-]Enzima digestiva
Especificaciones
| Forma | Líquido |
|---|---|
| Clasificación | Libre de origen animal |
| Esterilidad | Filtrado estéril |
| Vida útil | 24 meses |
| Endotoxina | ≤1 EU/mL |
| Osmolalidad | 300–380 mOsmol/kg |
| Nivel de pH | 7.0–7.4 |
| Condiciones de almacenamiento | 2~8 ℃ |
| Condiciones de envío | Hielo azul |
| Área de aplicación | Reactivos para cultivo celular |
| Categoría de producto | Reactivos de disociación |
Acerca de este producto
¿Qué líneas celulares admite este producto?
¿Cómo se envía este producto?
¿Está disponible un Certificado de Análisis?
¿Cuál es el plazo de entrega habitual?
¿Ofrecen precios a granel?
Más información sobre esto
- Medio químicamente definidoUn medio químicamente definido es un medio de cultivo celular en el que se conocen la identidad y la concentración de todos sus componentes: sin suero, sin hidrolizados de proteínas y sin extractos indefinidos. Puede contener proteínas, siempre que sean recombinantes y de secuencia y concentración conocidas; por eso «químicamente definido» y «sin proteínas» son categorías distintas y no sinónimos. Los medios químicamente definidos eliminan la variabilidad entre lotes, el riesgo de agentes adventicios y la carga regulatoria asociados al suero, y son el estándar en la producción biofarmacéutica con sistemas CHO, HEK293 e hibridomas.
- Recuento de células con hemocitómetroUn hemocitómetro es un portaobjetos de vidrio grueso con una cuadrícula grabada con precisión sobre la que un cubreobjetos crea una cámara de exactamente 0,1 mm de profundidad, de modo que un volumen conocido de suspensión celular puede contarse al microscopio y convertirse en una concentración. Para células de mamífero se cuentan los cuatro cuadros de las esquinas de 1 mm2, se calcula la media, se multiplica por el factor de dilución y se multiplica por 10^4 para obtener células por mL, porque cada cuadro de esquina encierra exactamente 10^-4 mL. Mezclar la muestra 1:1 con azul de tripano al 0,4% antes de cargar la cámara permite obtener el porcentaje de viabilidad a partir del mismo recuento, ya que solo las células muertas, con la membrana comprometida, captan el colorante.
- Trypsin-EDTAEl Trypsin-EDTA es un reactivo de disociación celular que combina la tripsina, una serina proteasa que corta enlaces peptídicos por el lado C-terminal de los residuos de lisina y arginina en las proteínas de superficie y de la matriz, con el quelante EDTA, que fija los iones calcio y magnesio que necesitan las moléculas de adhesión celular. Se suministra en una solución salina equilibrada sin calcio ni magnesio, lo más habitual al 0.05% de tripsina (0.5 g/L) para líneas celulares de rutina y al 0.25% (2.5 g/L) para células firmemente adheridas y cultivos primarios. El uso típico son 2-5 minutos a 37 °C, seguidos de inmediato por la neutralización con medio con suero o con un inhibidor de tripsina definido.
- Subcultivo celular (pase)El subcultivo celular, también llamado pase, es el traspaso de las células de un cultivo que se aproxima a la confluencia a recipientes nuevos con medio fresco para que el crecimiento pueda continuar. Las células adherentes se despegan primero, normalmente con Trypsin-EDTA al 0.25% o al 0.05% o con un reactivo de disociación no enzimático, y se vuelven a sembrar a una densidad menor fijada por una proporción de división como 1:4; las células en suspensión simplemente se diluyen en medio fresco sin ningún paso de disociación. La mayoría de las líneas celulares adherentes continuas se subcultivan al 70-80% de confluencia, lo que suele significar dos o tres pases por semana.
- Tripsina frente a Accutase: cómo elegir un reactivo de disociación celularLa tripsina es una serina proteasa pancreática que corta los enlaces peptídicos después de lisina y arginina; despega las células deprisa, pero sin discriminar: hay que detenerla con suero o con un inhibidor de tripsina, y corta las proteínas de superficie junto con los contactos de adhesión. Accutase es una mezcla propietaria de enzimas proteolíticas y colagenolíticas de origen invertebrado, suministrada en DPBS sin calcio ni magnesio con 0.5 mM de EDTA; actúa de forma más lenta y suave, no requiere paso de neutralización y conserva más epítopos de superficie. Elija tripsina para el subcultivo rutinario de líneas adherentes robustas, cuando importa la velocidad y las células vuelven directamente al cultivo; elija Accutase cuando las células recogidas son el experimento: citometría de flujo sobre marcadores de superficie, células madre pluripotentes, neuronas primarias o cualquier suspensión de células individuales en la que la viabilidad y el fenotipo deban sobrevivir a la recogida.
- Recubrimiento con poly-L-lysine para cultivo celularEl recubrimiento con poly-L-lysine cubre la superficie de cultivo con un polímero sintético de carga positiva que se une a la membrana plasmática, cargada negativamente, y permite que las células poco adherentes se fijen al vidrio o al plástico. El protocolo estándar aplica una disolución estéril al 0.01% (0.1 mg/mL) a razón de aproximadamente 1 mL por cada 25 cm2, la deja en contacto con la superficie de 5 minutos a 1 hora a temperatura ambiente, la aspira, enjuaga a fondo con agua estéril de grado cultivo celular y seca la superficie al aire durante al menos 2 horas antes de sembrar las células. La adhesión que proporciona es puramente electrostática: la poly-L-lysine no activa las integrinas, de modo que las células que necesitan una señal real de la matriz extracelular requieren laminina, fibronectina o colágeno en su lugar o por encima de ella.
