Agua destilada estéril de endotoxina ultrabaja
El agua destilada estéril con endotoxinas ultrabajas es un reactivo de agua de grado cultivo celular para preparar, diluir y enjuagar soluciones relacionadas con el cultivo cuando se requiere baja contribución iónica y biocarga controlada. CCM-RG-0018 se suministra como líquido de 500 mL, libre de origen animal, esterilizado por filtración y especificado para endotoxinas por debajo de 0.25 EU/mL. Es adecuado para flujos de trabajo rutinarios de laboratorio, soporte de ensayos y uso en desarrollo de bioprocesos. CellCultureMedia ofrece soporte de compra transparente, documentación bajo solicitud y envío gratuito a todo el mundo donde lo permitan las regulaciones del destino.
- ✓ Envío mundial gratuito
- ✓ Fabricación alineada con ISO
- ✓ Certificado de análisis previa solicitud
- ✓ Cotización de volúmenes a granel y personalizados previa solicitud
Descripción general
CCM-RG-0018 es agua destilada estéril fabricada para flujos de trabajo con reactivos de cultivo celular. El título de origen se traduce como “Agua destilada con endotoxinas ultrabajas, esterilizada por filtración, grado cultivo celular.” El producto se suministra en formato líquido de 500 mL para laboratorios que requieren un aporte de agua consistente y bajo en endotoxinas para preparación relacionada con medios, dilución de buffers, reconstitución de reactivos, enjuague de accesorios en contacto con cultivos y otras tareas de soporte para investigación o bioprocesos.
Las especificaciones clave incluyen clasificación libre de origen animal, esterilidad por filtración, endotoxinas por debajo de 0.25 EU/mL, osmolalidad de 0–20 mOsmol/kg y pH 5.0–7.0. Estos parámetros hacen que el material sea apropiado cuando los usuarios necesitan baja carga iónica, fondo mínimo de endotoxinas y un perfil de calidad definido, en lugar de agua de laboratorio de uso general. El producto pertenece al segmento de agua para cultivo celular de nuestro portafolio de reactivos de cultivo celular y puede pedirse como una sola botella o incorporarse en planes recurrentes de suministro de reactivos.
Aplicaciones
- Preparación o dilución de reactivos relacionados con el cultivo celular cuando un bajo aporte de endotoxinas es importante para la consistencia experimental.
- Reconstitución de materiales de laboratorio secos o concentrados compatibles según el protocolo validado del usuario.
- Pasos de enjuague y humectación para artículos de soporte de cultivo no críticos cuando se requiere un aporte de agua estéril y de baja osmolalidad.
- Flujos de trabajo de desarrollo de procesos a escala de investigación que requieren especificaciones de agua controladas para estudios comparativos de medios o buffers.
- Uso en laboratorios académicos, biotecnológicos y biofarmacéuticos en operaciones de soporte de cultivo celular, incluido el desarrollo de procesos upstream y la preparación analítica de muestras.
Esta agua no es un medio completo y no contiene sales, aminoácidos, proteínas, suero, suplementos de crecimiento, buffers, antibióticos ni phenol red. Los usuarios deben verificar la compatibilidad con cada formulación, tipo celular y paso del proceso antes del uso rutinario. Para soporte de cotización, pedidos permanentes o adquisiciones para múltiples sitios, envíe los requisitos mediante Solicitar una cotización con el tamaño de empaque requerido, el volumen previsto y el país de destino.
Almacenamiento y manipulación
Almacene las botellas sin abrir a 2–30 °C protegidas de la luz. La vida útil indicada es de 24 meses cuando se almacena bajo las condiciones recomendadas y se manipula según la práctica estándar de laboratorio aséptico. El envío es a temperatura ambiente, lo que permite una logística internacional eficiente sin manejo de cadena de frío para este artículo. Después de abrir, use técnica aséptica, minimice la exposición repetida de la botella y siga los límites internos del laboratorio para el tiempo de retención de recipientes abiertos. No use el producto si el envase está dañado, comprometido, visiblemente contaminado o fuera del período de caducidad aplicable.
Calidad y documentación
CellCultureMedia suministra CCM-RG-0018 para entornos de investigación, desarrollo y soporte de bioprocesamiento que requieren compras basadas en especificaciones. La producción y la liberación se gestionan bajo prácticas de calidad alineadas con ISO, con controles a nivel de lote para estado de esterilidad, endotoxinas, pH, osmolalidad, apariencia, etiquetado y asignación de vida útil. Un Certificado de Análisis está disponible bajo solicitud, y los equipos de compras pueden solicitar hojas de especificaciones o documentación adicional a través de nuestra página de Calidad. El precio de lista actual de 500 mL es USD 48.61, con envío gratuito a todo el mundo ofrecido para destinos y configuraciones de pedido elegibles.
Especificaciones
| Forma | Líquido |
|---|---|
| Clasificación | Libre de origen animal |
| Esterilidad | Esterilizado por filtración |
| Vida útil | 24 meses |
| Endotoxina | <0.25 EU/mL |
| Osmolalidad | 0–20 mOsmol/kg |
| Nivel de pH | 5.0–7.0 |
| Condiciones de almacenamiento | 2~30 ℃, protegido de la luz |
| Condiciones de envío | Temperatura ambiente |
| Área de aplicación | Reactivos relacionados con el cultivo celular |
| Categoría de producto | Agua para cultivo celular |
Acerca de este producto
¿Qué líneas celulares admite este producto?
¿Cómo se envía este producto?
¿Está disponible un Certificado de Análisis?
¿Cuál es el plazo de entrega habitual?
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Más información sobre esto
- Contaminación en el cultivo celularLa contaminación del cultivo celular se agrupa en seis categorías: bacterias, levaduras, hongos filamentosos y mohos, micoplasma, virus y contaminación cruzada con otra línea celular. Las bacterias, las levaduras y los hongos se manifiestan en un plazo de uno a cinco días mediante turbidez, un cambio de pH o partículas visibles al microscopio, y se resuelven descartando el cultivo y localizando el fallo de técnica que permitió su entrada. El micoplasma, la contaminación viral y la identificación errónea de la línea celular no producen ningún cambio visible y solo se detectan mediante ensayos: PCR o tinción de ADN para el micoplasma, y perfil de STR para la identidad. La respuesta correcta ante cualquier contaminación biológica confirmada es descartar el cultivo afectado, descontaminar el incubador y reiniciar a partir de un vial congelado limpio.
- Tampón HEPES en el cultivo celularEl HEPES (ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanosulfónico) es un tampón orgánico zwitteriónico que se emplea en cultivo celular para mantener el medio a pH fisiológico sin depender del CO2 del incubador. Su pKa es de unos 7,5 a 20-25 °C y de unos 7,3 a 37 °C, lo que ofrece una capacidad tamponante útil en un intervalo aproximado de pH 6,8-8,2, y habitualmente se añade al medio a 10-25 mM a partir de una disolución madre estéril 1 M. Como la acción tamponante del HEPES no depende del equilibrio ácido carbónico/bicarbonato, el medio suplementado con HEPES resiste la rápida deriva alcalina que se produce cuando un frasco sale de un incubador con 5% de CO2.
- Tampón de lisis ACKEl tampón de lisis ACK (cloruro de amonio-potasio) es una solución isotónica de cloruro de amonio que se emplea para eliminar los eritrocitos de preparaciones de leucocitos como el bazo de ratón, la médula ósea y la capa leucocitaria. La composición estándar es 150 mM de cloruro de amonio (8.02 g/L de NH4Cl), 10 mM de bicarbonato de potasio (1.0 g/L de KHCO3) y 0.1 mM de EDTA disódico, ajustada a pH 7.2-7.4. Los eritrocitos se lisan osmóticamente en uno a cinco minutos a temperatura ambiente, porque su intercambiador aniónico banda 3 y su elevada actividad anhidrasa carbónica impulsan la entrada de cloruro de amonio y agua en la célula, mientras que los leucocitos, que carecen de esa capacidad de transporte, sobreviven.
- Ensayo de endotoxinas en el cultivo celularEl ensayo de endotoxinas mide el lipopolisacárido bacteriano (LPS) presente en el agua de laboratorio, los medios, los sueros y los reactivos, y se expresa en unidades de endotoxina por mililitro (EU/mL), donde 1 EU equivale aproximadamente a 0.1–0.2 ng de la endotoxina de E. coli del estándar de referencia. Los métodos oficiales son el ensayo LAL (lisado de amebocitos de Limulus) en sus formatos de gelificación, turbidimétrico y cromogénico, recogidos en el capítulo USP <85>, y el ensayo con Factor C recombinante (rFC), libre de origen animal, recogido en USP <86>; los formatos cinéticos cuantifican hasta cerca de 0.001–0.005 EU/mL. Los límites prácticos en cultivo celular son 0.25 EU/mL para el agua, ≤1 EU/mL para la mayoría de los reactivos de grado cultivo celular y ≤10 EU/mL como estándar general del sector para el suero fetal bovino, con grados de baja endotoxina a ≤1 EU/mL y grados de endotoxina ultrabaja por debajo de 0.1 EU/mL. La endotoxina sobrevive al autoclave y atraviesa los filtros de 0.2 µm, de modo que hay que excluirla en el origen en lugar de intentar eliminarla después.
- Disolución de glucosa en cultivo celularUna disolución de glucosa para cultivo celular es una disolución madre estéril y concentrada de D-glucosa, suministrada habitualmente a 300-450 g/L (30-45 % p/v), que se emplea para suplementar los medios basales y para alimentar cultivos que consumen glucosa más rápido de lo que el medio la aporta. La D-glucosa tiene una masa molecular de 180,16, de modo que 1 g/L equivale a 5,55 mM: los medios estándar van desde 1 g/L (5,5 mM) en el DMEM bajo en glucosa, pasando por 2 g/L (11,1 mM) en el RPMI 1640, hasta 4,5 g/L (25 mM) en el DMEM alto en glucosa. La glucosa se añade para evitar su agotamiento en cultivos prolongados o de alta densidad, y normalmente se esteriliza por filtración en lugar de en autoclave, porque calentar glucosa junto con aminoácidos genera productos de pardeamiento.
- Tampones para cultivo celularLos tampones para cultivo celular mantienen el medio en el intervalo de pH 7,2-7,4 que necesitan las células de mamífero, frente a la carga ácida que estas generan al metabolizar. El sistema por defecto en casi todos los medios clásicos es el bicarbonato de sodio trabajando con el CO2 de la atmósfera del incubador, motivo por el cual el contenido de bicarbonato debe ajustarse a la configuración del incubador: unos 1,5-2,2 g/L de NaHCO3 para 5 % de CO2 y 3,7 g/L para 10 % de CO2. Los tampones orgánicos como el HEPES (pKa 7,48) se añaden a 10-25 mM para mantener el pH cuando los cultivos están fuera de una atmósfera de CO2, mientras que las disoluciones tamponadas con fosfato, como el PBS y el DPBS, se emplean para el lavado y la manipulación de corta duración, no para el crecimiento.
- DispasaLa dispasa, comercializada también como dispasa II o proteasa neutra, es una metaloproteasa dependiente de zinc de Paenibacillus (antes Bacillus) polymyxa, EC 3.4.24.4, que se emplea para la disociación suave de tejidos y para desprender células y láminas epiteliales intactas. Corta la fibronectina y el colágeno de tipo IV, degrada solo mínimamente el colágeno de tipo I y no corta la laminina ni el colágeno de tipo V, y por eso permite separar una epidermis de la dermis o levantar una lámina epitelial confluente del plástico sin destruir las uniones intercelulares. Como es una metaloproteasa que necesita zinc para la catálisis y calcio para su estabilidad, la inhiben el EDTA, el EGTA y la 1,10-fenantrolina, y debe diluirse en un tampón con calcio y nunca en uno basado en quelantes.
- Recubrimiento con poly-L-lysine para cultivo celularEl recubrimiento con poly-L-lysine cubre la superficie de cultivo con un polímero sintético de carga positiva que se une a la membrana plasmática, cargada negativamente, y permite que las células poco adherentes se fijen al vidrio o al plástico. El protocolo estándar aplica una disolución estéril al 0.01% (0.1 mg/mL) a razón de aproximadamente 1 mL por cada 25 cm2, la deja en contacto con la superficie de 5 minutos a 1 hora a temperatura ambiente, la aspira, enjuaga a fondo con agua estéril de grado cultivo celular y seca la superficie al aire durante al menos 2 horas antes de sembrar las células. La adhesión que proporciona es puramente electrostática: la poly-L-lysine no activa las integrinas, de modo que las células que necesitan una señal real de la matriz extracelular requieren laminina, fibronectina o colágeno en su lugar o por encima de ella.
