Solución de Trypsin-EDTA al 0.05%, 500 mL
0.05% Trypsin-EDTA Solution es un reactivo líquido listo para usar para desprender células adherentes durante flujos de trabajo rutinarios de subcultivo y cosecha de cultivo celular. CCM-RG-0045 se suministra como una formulación líquida congelada de 500 mL que contiene phenol red, 0.5 g/L trypsin y 0.2 g/L EDTA·4Na. Está esterilizada por filtración, clasificada como de origen animal y especificada para pH 7.2–8.0 y osmolalidad 270–320 mOsmol/kg. Hay envío mundial gratuito disponible con logística de hielo seco para control de temperatura.
- ✓ Envío mundial gratuito
- ✓ Fabricación alineada con ISO
- ✓ Certificado de análisis previa solicitud
- ✓ Cotización de volúmenes a granel y personalizados previa solicitud
Descripción general
CCM-RG-0045 es un reactivo de disociación celular Trypsin-EDTA al 0.05% formulado para el desprendimiento controlado de monocapas de células adherentes de recipientes de cultivo estándar. La formulación combina 0.5 g/L trypsin con 0.2 g/L EDTA·4Na, favoreciendo la liberación de células desde puntos de adhesión extracelular mediante proteólisis y quelación. Phenol red se incluye como indicador visual de pH para comprobaciones rutinarias de manipulación. La solución se suministra como un producto líquido, esterilizado por filtración, en formato de 500 mL para laboratorios y equipos de desarrollo de procesos que estandarizan operaciones de subcultivo.
Este reactivo está clasificado como de origen animal y está destinado a investigación en cultivo celular, preparación de ensayos, trabajo de tren de siembra y desarrollo de bioprocesos donde se requiere una concentración definida de trypsin-EDTA. Las especificaciones de liberación incluyen pH 7.2–8.0 y osmolalidad de 270–320 mOsmol/kg, lo que favorece la compatibilidad con entornos habituales de cultivo celular de mamíferos. Para tampones de disociación, soluciones salinas balanceadas y suplementos de medios relacionados, revise nuestro portafolio de reactivos de cultivo celular.
Aplicaciones
- Desprendimiento y subcultivo rutinarios de cultivos celulares de mamíferos adherentes en frascos, placas, botellas roller y placas multipocillo.
- Preparación de suspensiones unicelulares antes de flujos de trabajo de recuento celular, evaluación de viabilidad, siembra en placa, expansión o criopreservación.
- Estudios de I+D y desarrollo de procesos que requieren una concentración suave de trypsin al 0.05% con disociación asistida por EDTA.
- Soporte de escalado para operaciones de tren de siembra donde son importantes tiempos de desprendimiento constantes, documentación de lote y continuidad de suministro.
- Flujos de trabajo de laboratorio donde phenol red proporciona una confirmación visual rápida de que el reactivo no ha sufrido un cambio evidente de pH durante el uso rutinario.
Para obtener resultados óptimos, los usuarios deben validar el tiempo de exposición, el método de neutralización y los pasos de lavado para cada tipo celular y formato de recipiente. Las líneas sensibles pueden requerir tiempos de contacto más cortos, prelavado para reducir el arrastre de suero o condiciones alternativas de disociación seleccionadas durante la cualificación interna del método.
Almacenamiento y manipulación
Almacene CCM-RG-0045 a -30 to -5 °C protegido de la luz. El producto se envía en hielo seco y se especifica con una vida útil de 24 meses cuando se almacena según lo recomendado y se mantiene sellado. Descongele a temperatura controlada, mezcle suavemente después de la descongelación y evite ciclos repetidos de congelación-descongelación al alicuotar en recipientes estériles y validados si su flujo de trabajo lo requiere. Utilice técnica aséptica después de abrir y mantenga la botella cerrada cuando no esté en uso. No usar si el envase está comprometido, si la solución muestra turbidez inesperada o si las comprobaciones internas de aceptación indican rendimiento fuera de rango.
Calidad y documentación
CellCultureMedia suministra CCM-RG-0045 para equipos de compras que requieren control de lote trazable, visibilidad de especificaciones y reposición confiable. Los flujos de fabricación y liberación están alineados con ISO, y el producto está esterilizado por filtración para uso como reactivo de cultivo celular. Hay un Certificado de Análisis disponible bajo solicitud y puede incluir confirmación específica de lote de esterilidad, pH, osmolalidad, vida útil y otros parámetros liberados. La especificación de endotoxinas no figura en los parámetros de liberación suministrados; si se requiere reporte de endotoxinas para su flujo de trabajo, solicite datos específicos de lote antes de la compra.
Para soporte de documentación, visite nuestra página de información de calidad o envíe una consulta de volumen a través de solicitar una cotización. El pedido estándar está disponible para el tamaño de 500 mL, con opciones de precios por volumen para demanda recurrente cualificada. Hay envío mundial gratuito disponible, con embalaje de hielo seco seleccionado para preservar la condición congelada durante el transporte.
Aspectos destacados de la formulación
Contiene (+)
Phenol red, 0.5 g/L trypsin, 0.2 g/L EDTA·4Na
Especificaciones
| Forma | Líquido |
|---|---|
| Clasificación | Origen animal |
| Esterilidad | Esterilizado por filtración |
| Vida útil | 24 meses |
| Osmolalidad | 270–320 mOsmol/kg |
| Nivel de pH | 7.2–8.0 |
| Condiciones de almacenamiento | -30~-5 ℃, protegido de la luz |
| Condiciones de envío | Dry ice |
| Área de aplicación | Reactivos relacionados con el cultivo celular |
| Categoría de producto | Reactivos de disociación y digestión celular |
Acerca de este producto
¿Qué líneas celulares admite este producto?
¿Cómo se envía este producto?
¿Está disponible un Certificado de Análisis?
¿Cuál es el plazo de entrega habitual?
¿Ofrecen precios a granel?
Más información sobre esto
- Recuento de células con hemocitómetroUn hemocitómetro es un portaobjetos de vidrio grueso con una cuadrícula grabada con precisión sobre la que un cubreobjetos crea una cámara de exactamente 0,1 mm de profundidad, de modo que un volumen conocido de suspensión celular puede contarse al microscopio y convertirse en una concentración. Para células de mamífero se cuentan los cuatro cuadros de las esquinas de 1 mm2, se calcula la media, se multiplica por el factor de dilución y se multiplica por 10^4 para obtener células por mL, porque cada cuadro de esquina encierra exactamente 10^-4 mL. Mezclar la muestra 1:1 con azul de tripano al 0,4% antes de cargar la cámara permite obtener el porcentaje de viabilidad a partir del mismo recuento, ya que solo las células muertas, con la membrana comprometida, captan el colorante.
- Trypsin-EDTAEl Trypsin-EDTA es un reactivo de disociación celular que combina la tripsina, una serina proteasa que corta enlaces peptídicos por el lado C-terminal de los residuos de lisina y arginina en las proteínas de superficie y de la matriz, con el quelante EDTA, que fija los iones calcio y magnesio que necesitan las moléculas de adhesión celular. Se suministra en una solución salina equilibrada sin calcio ni magnesio, lo más habitual al 0.05% de tripsina (0.5 g/L) para líneas celulares de rutina y al 0.25% (2.5 g/L) para células firmemente adheridas y cultivos primarios. El uso típico son 2-5 minutos a 37 °C, seguidos de inmediato por la neutralización con medio con suero o con un inhibidor de tripsina definido.
- Subcultivo celular (pase)El subcultivo celular, también llamado pase, es el traspaso de las células de un cultivo que se aproxima a la confluencia a recipientes nuevos con medio fresco para que el crecimiento pueda continuar. Las células adherentes se despegan primero, normalmente con Trypsin-EDTA al 0.25% o al 0.05% o con un reactivo de disociación no enzimático, y se vuelven a sembrar a una densidad menor fijada por una proporción de división como 1:4; las células en suspensión simplemente se diluyen en medio fresco sin ningún paso de disociación. La mayoría de las líneas celulares adherentes continuas se subcultivan al 70-80% de confluencia, lo que suele significar dos o tres pases por semana.
- Tripsina frente a Accutase: cómo elegir un reactivo de disociación celularLa tripsina es una serina proteasa pancreática que corta los enlaces peptídicos después de lisina y arginina; despega las células deprisa, pero sin discriminar: hay que detenerla con suero o con un inhibidor de tripsina, y corta las proteínas de superficie junto con los contactos de adhesión. Accutase es una mezcla propietaria de enzimas proteolíticas y colagenolíticas de origen invertebrado, suministrada en DPBS sin calcio ni magnesio con 0.5 mM de EDTA; actúa de forma más lenta y suave, no requiere paso de neutralización y conserva más epítopos de superficie. Elija tripsina para el subcultivo rutinario de líneas adherentes robustas, cuando importa la velocidad y las células vuelven directamente al cultivo; elija Accutase cuando las células recogidas son el experimento: citometría de flujo sobre marcadores de superficie, células madre pluripotentes, neuronas primarias o cualquier suspensión de células individuales en la que la viabilidad y el fenotipo deban sobrevivir a la recogida.
- Recubrimiento con poly-L-lysine para cultivo celularEl recubrimiento con poly-L-lysine cubre la superficie de cultivo con un polímero sintético de carga positiva que se une a la membrana plasmática, cargada negativamente, y permite que las células poco adherentes se fijen al vidrio o al plástico. El protocolo estándar aplica una disolución estéril al 0.01% (0.1 mg/mL) a razón de aproximadamente 1 mL por cada 25 cm2, la deja en contacto con la superficie de 5 minutos a 1 hora a temperatura ambiente, la aspira, enjuaga a fondo con agua estéril de grado cultivo celular y seca la superficie al aire durante al menos 2 horas antes de sembrar las células. La adhesión que proporciona es puramente electrostática: la poly-L-lysine no activa las integrinas, de modo que las células que necesitan una señal real de la matriz extracelular requieren laminina, fibronectina o colágeno en su lugar o por encima de ella.
