0.05% Trypsin-EDTA-Lösung, 500 mL
0.05% Trypsin-EDTA-Lösung ist ein gebrauchsfertiges flüssiges Reagenz zum Ablösen adhärenter Zellen während der routinemäßigen Zellkulturpassagierung und Ernte-Workflows. CCM-RG-0045 wird als 500 mL gefrorene flüssige Formulierung geliefert, die Phenol Red, 0.5 g/L Trypsin und 0.2 g/L EDTA·4Na enthält. Es ist filtersterilisiert, als tierischen Ursprungs klassifiziert und für pH 7.2–8.0 sowie Osmolalität 270–320 mOsmol/kg spezifiziert. Kostenloser weltweiter Versand ist mit Trockeneis-Logistik zur Temperaturkontrolle verfügbar.
- ✓ Kostenloser weltweiter Versand
- ✓ ISO-orientierte Herstellung
- ✓ Analysenzertifikat auf Anfrage
- ✓ Angebote für Großmengen und kundenspezifische Volumina auf Anfrage
Übersicht
CCM-RG-0045 ist ein 0.05% Trypsin-EDTA-Zelldissoziationsreagenz, formuliert für die kontrollierte Ablösung adhärenter Zellmonolayer von Standard-Kulturgefäßen. Die Formulierung kombiniert 0.5 g/L Trypsin mit 0.2 g/L EDTA·4Na und unterstützt die proteolytische und chelatierungsgetriebene Freisetzung von Zellen von extrazellulären Anheftungspunkten. Phenol Red ist als visueller pH-Indikator für routinemäßige Handhabungskontrollen enthalten. Die Lösung wird als flüssiges, filtersterilisiertes Produkt im 500 mL-Format für Labore und Prozessentwicklungsteams geliefert, die Passagierungsabläufe standardisieren.
Dieses Reagenz ist als tierischen Ursprungs klassifiziert und für Zellkulturforschung, Assay-Vorbereitung, Seed-Train-Arbeiten und Bioprozessentwicklung vorgesehen, bei denen eine definierte Trypsin-EDTA-Konzentration erforderlich ist. Freigabespezifikationen umfassen pH 7.2–8.0 und eine Osmolalität von 270–320 mOsmol/kg, wodurch die Kompatibilität mit gängigen Umgebungen für Säugerzellkulturen unterstützt wird. Für verwandte Dissoziationspuffer, ausgewogene Salzlösungen und Medienzusätze sehen Sie sich unser Portfolio an Zellkulturreagenzien an.
Anwendungen
- Routinemäßige Ablösung und Passagierung adhärenter Säugerzellkulturen in Flaschen, Schalen, Rollerflaschen und Multiwell-Platten.
- Herstellung von Einzelzellsuspensionen vor Zellzählung, Viabilitätsbewertung, Ausplattierung, Expansion oder Kryokonservierungs-Workflows.
- F&E- und Prozessentwicklungsstudien, die eine milde 0.05% Trypsin-Konzentration mit EDTA-unterstützter Dissoziation erfordern.
- Scale-up-Unterstützung für Seed-Train-Operationen, bei denen konsistente Ablösezeiten, Chargendokumentation und Beschaffungskontinuität wichtig sind.
- Labor-Workflows, bei denen Phenol Red eine schnelle visuelle Bestätigung liefert, dass das Reagenz während der routinemäßigen Verwendung keine offensichtliche pH-Verschiebung erfahren hat.
Für optimale Ergebnisse sollten Anwender Expositionszeit, Neutralisationsmethode und Waschschritte für jeden Zelltyp und jedes Gefäßformat validieren. Empfindliche Linien können kürzere Kontaktzeiten, Vorspülen zur Reduzierung von Serumverschleppung oder alternative Dissoziationsbedingungen erfordern, die während der internen Methodenqualifizierung ausgewählt werden.
Lagerung und Handhabung
CCM-RG-0045 bei -30 bis -5 °C vor Licht geschützt lagern. Das Produkt wird auf Trockeneis versendet und ist mit einer Haltbarkeit von 24 Monaten spezifiziert, wenn es wie empfohlen gelagert und verschlossen gehalten wird. Bei kontrollierter Temperatur auftauen, nach dem Auftauen vorsichtig mischen und wiederholte Gefrier-Auftau-Zyklen vermeiden, indem bei Bedarf für Ihren Workflow in sterile, validierte Behälter aliquotiert wird. Nach dem Öffnen aseptische Technik anwenden und die Flasche geschlossen halten, wenn sie nicht in Gebrauch ist. Nicht verwenden, wenn der Behälter beeinträchtigt ist, die Lösung unerwartete Trübung zeigt oder interne Annahmeprüfungen eine Leistung außerhalb des Bereichs anzeigen.
Qualität und Dokumentation
CellCultureMedia liefert CCM-RG-0045 für Beschaffungsteams, die rückverfolgbare Chargenkontrolle, Spezifikationstransparenz und zuverlässige Nachversorgung benötigen. Herstellungs- und Freigabe-Workflows sind ISO-ausgerichtet, und das Produkt ist für die Verwendung als Zellkulturreagenz filtersterilisiert. Ein Analysenzertifikat ist auf Anfrage erhältlich und kann eine chargenspezifische Bestätigung von Sterilität, pH, Osmolalität, Haltbarkeit und anderen freigegebenen Parametern enthalten. Eine Endotoxin-Spezifikation ist in den bereitgestellten Freigabeparametern nicht aufgeführt; wenn eine Endotoxin-Berichterstattung für Ihren Workflow erforderlich ist, fordern Sie vor dem Kauf chargenspezifische Daten an.
Für Dokumentationsunterstützung besuchen Sie unsere Seite Qualitätsinformationen oder reichen Sie eine Volumenanfrage über Angebot anfordern ein. Die Standardbestellung ist für die 500 mL-Größe verfügbar, mit Mengenpreisoptionen für qualifizierten wiederkehrenden Bedarf. Kostenloser weltweiter Versand ist verfügbar, wobei Trockeneis-Verpackung ausgewählt wird, um den gefrorenen Zustand während des Transports zu erhalten.
Highlights der Formulierung
Enthält (+)
Phenol red, 0.5 g/L trypsin, 0.2 g/L EDTA·4Na
Spezifikationen
| Form | Flüssig |
|---|---|
| Klassifizierung | Tierischen Ursprungs |
| Sterilität | Filtersterilisiert |
| Haltbarkeit | 24 Monate |
| Osmolalität | 270–320 mOsmol/kg |
| pH-Wert | 7.2–8.0 |
| Lagerbedingungen | -30~-5 ℃, vor Licht geschützt |
| Versandbedingungen | Dry ice |
| Anwendungsbereich | Zellkulturbezogene Reagenzien |
| Produktkategorie | Zelldissoziations- und Verdauungsreagenzien |
Über dieses Produkt
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- Zellzählung mit der ZählkammerEine Zählkammer ist ein dicker Glasobjektträger mit präzise eingeätztem Gitter, über dem ein Deckglas eine genau 0.1 mm tiefe Kammer bildet, sodass sich ein bekanntes Volumen einer Zellsuspension unter dem Mikroskop auszählen und in eine Konzentration umrechnen lässt. Bei Säugerzellen zählt man die vier Eckquadrate von je 1 mm2, bildet den Mittelwert, multipliziert mit dem Verdünnungsfaktor und mit 10^4 und erhält so Zellen pro mL — denn jedes Eckquadrat umschließt genau 10^-4 mL. Mischt man die Probe vor dem Befüllen 1:1 mit 0.4% Trypanblau, liefert dieselbe Zählung zugleich den Viabilitätsanteil, da nur tote Zellen mit geschädigter Membran den Farbstoff aufnehmen.
- Trypsin-EDTATrypsin-EDTA ist ein Reagenz zur Zelldissoziation, das die Serinprotease Trypsin — sie spaltet Peptidbindungen C-terminal von Lysin- und Argininresten in Zelloberflächen- und Matrixproteinen — mit dem Komplexbildner EDTA kombiniert, der die von Zelladhäsionsmolekülen benötigten Calcium- und Magnesiumionen bindet. Geliefert wird es in einer Calcium- und Magnesium-freien ausgewogenen Salzlösung, meist mit 0.05% Trypsin (0.5 g/L) für gängige Zelllinien und 0.25% (2.5 g/L) für fest anhaftende Zellen und Primärkulturen. Üblich sind 2-5 Minuten bei 37 °C, gefolgt von der sofortigen Neutralisation mit serumhaltigem Medium oder einem definierten Trypsininhibitor.
- Subkultivierung von Zellen (Passagieren)Die Subkultivierung von Zellen, auch Passagieren genannt, ist die Überführung von Zellen aus einer Kultur, die sich der Konfluenz nähert, in frische Gefäße mit frischem Medium, damit das Wachstum weitergehen kann. Adhärente Zellen werden zuerst abgelöst, meist mit 0.25% oder 0.05% Trypsin-EDTA oder einem nicht enzymatischen Dissoziationsreagenz, und dann in geringerer Dichte neu ausgesät, festgelegt durch ein Teilungsverhältnis wie 1:4; Suspensionszellen werden ohne jeden Dissoziationsschritt einfach in frisches Medium verdünnt. Die meisten kontinuierlichen adhärenten Zelllinien werden bei 70-80% Konfluenz subkultiviert, was in der Regel zwei bis drei Passagen pro Woche bedeutet.
- Trypsin vs. Accutase: Das richtige Zelldissoziationsreagenz wählenTrypsin ist eine Serinprotease aus dem Pankreas, die Peptidbindungen nach Lysin und Arginin spaltet. Sie löst Zellen schnell, aber unselektiv ab, muss mit Serum oder einem Trypsininhibitor gestoppt werden und spaltet neben den Adhäsionskontakten auch Oberflächenproteine. Accutase ist eine proprietäre Mischung proteolytischer und kollagenolytischer Enzyme aus einer wirbellosen Quelle, geliefert in calcium- und magnesiumfreiem DPBS mit 0.5 mM EDTA; sie wirkt langsamer und schonender, benötigt keinen Neutralisationsschritt und erhält mehr Oberflächenepitope. Wählen Sie Trypsin für das routinemäßige Passagieren robuster adhärenter Linien, wenn es auf Tempo ankommt und die Zellen direkt zurück in Kultur gehen; wählen Sie Accutase, wenn die geernteten Zellen selbst das Experiment sind — Durchflusszytometrie auf Oberflächenmarker, pluripotente Stammzellen, primäre Neurone oder jede Einzelzellsuspension, in der Lebensfähigkeit und Phänotyp die Ernte überstehen müssen.
