Libreria di riferimento sulla coltura cellulare
Che cosa sono davvero i terreni, i tamponi e i reagenti di coltura: composizione, impiego e differenze rispetto alle alternative. Scritto per il bancone, non per una brochure.
Media and formulations
Terreno chimicamente definito
Un terreno chimicamente definito è un terreno di coltura cellulare in cui l'identità e la concentrazione di ogni singolo componente sono note: nessun siero, nessun idrolizzato proteico, nessun estratto non caratterizzato. Può comunque contenere proteine, purché ricombinanti e di sequenza e concentrazione note, ed è per questo che «chimicamente definito» e «privo di proteine» sono due categorie distinte e non sinonimi. I terreni chimicamente definiti eliminano la variabilità tra lotti, il rischio di agenti avventizi e il carico regolatorio associati al siero, e costituiscono lo standard per la produzione biofarmaceutica nei sistemi CHO, HEK293 e ibridoma.
→Terreno RPMI 1640
RPMI 1640 è un terreno basale per coltura cellulare messo a punto al Roswell Park Memorial Institute nel 1966 per far crescere in sospensione i leucociti umani. Contiene 2,000 mg/L di glucosio (11.1 mM) e 2,000 mg/L di bicarbonato di sodio (23.8 mM), calibrati su un'atmosfera al 5% di CO2, una quota di fosfato insolitamente alta (circa 5.6 mM), calcio basso (circa 0.42 mM) e un insieme di componenti caratteristico che comprende glutatione ridotto, biotina, vitamina B12, acido para-amminobenzoico e idrossiprolina. È il terreno di riferimento per linfociti, ibridomi e per la maggior parte delle linee ematopoietiche e linfoidi adattate alla sospensione, di norma integrato con il 10% di siero fetale bovino.
→α-MEM (MEM alfa) e terreno minimo essenziale
α-MEM (MEM alfa) è il terreno minimo essenziale di Eagle arricchito con tutti gli amminoacidi non essenziali, piruvato di sodio, acido lipoico, acido ascorbico, biotina e vitamina B12, ed è fornito con o senza ribonucleosidi e desossiribonucleosidi. Usa la stessa base salina di MEM — 2,200 mg/L di bicarbonato di sodio calibrati su un'atmosfera al 5% di CO2, 1,000 mg/L di glucosio e 1.8 mM di calcio — ed è il terreno di riferimento per le cellule stromali mesenchimali, le colture di midollo osseo, gli osteoblasti, la selezione di CHO-DXB11 e CHO-DG44 e molti tipi di cellule primarie. La versione senza nucleosidi è indispensabile per i sistemi di selezione basati su HAT e su metotrexato.
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