Solución de 0.5 mM EDTA, sin calcio/magnesio
La solución de 0.5 mM EDTA, sin calcio/magnesio, es un reactivo de disociación celular estéril, libre de origen animal, suministrado sin phenol red para flujos de trabajo rutinarios de cultivo celular. CCM-RG-0010 se proporciona como líquido listo para usar en formato de 500 mL para laboratorios que necesitan un reactivo de quelación no enzimático para la liberación de células adherentes, pasos de lavado y soporte de procesos de cultivo. Está disponible en CellCultureMedia con envío mundial gratuito y soporte de cotización a través de solicitar una cotización.
- ✓ Envío mundial gratuito
- ✓ Fabricación alineada con ISO
- ✓ Certificado de análisis previa solicitud
- ✓ Cotización de volúmenes a granel y personalizados previa solicitud
Descripción general
CCM-RG-0010 es un reactivo líquido de 0.5 mM EDTA formulado sin iones de calcio, iones de magnesio ni phenol red. EDTA favorece el desprendimiento celular al quelar cationes divalentes que contribuyen a la adhesión célula-superficie y célula-célula. La ausencia de calcio y magnesio hace que la solución sea adecuada para flujos de trabajo en los que se necesita reducir la adhesión dependiente de cationes antes del subcultivo, la cosecha, el recuento o el procesamiento posterior del cultivo. El formato sin phenol red es útil cuando no se desea arrastre de indicador de color en obtención de imágenes, lecturas analíticas o pasos sensibles a la formulación.
Este reactivo de 500 mL está clasificado como libre de origen animal y filtrado estérilmente, con una especificación de endotoxinas de ≤1 EU/mL y una vida útil declarada de 48 meses cuando se almacena según las indicaciones. Está posicionado dentro de reactivos de cultivo celular para programas de compras que requieren reactivos de disociación definidos con documentación clara, trazabilidad de lotes y suministro predecible. El producto se suministra como líquido listo para usar, reduciendo el tiempo de preparación interna y ayudando a los equipos a estandarizar las condiciones de disociación en entornos de I+D, desarrollo de procesos y soporte de producción rutinaria.
Aplicaciones
- Soporte de disociación no enzimática para cultivo de células de mamífero adherentes cuando se prefiere un paso de quelación suave en lugar de una liberación basada en proteasas.
- Paso de enjuague o incubación previo al subcultivo para cultivos en monocapa que requieren condiciones sin calcio ni magnesio antes del desprendimiento o la cosecha.
- Flujos de trabajo de manipulación sin phenol red donde los ensayos ópticos, la obtención de imágenes o los estudios de formulación de medios se benefician de un menor arrastre de indicador de color.
- Desarrollo de procesos de cultivo celular donde se especifican reactivos auxiliares libres de origen animal para control de materiales, cualificación de proveedores o planificación de escalado.
- Preparación de células para recuento, resiembra, configuración experimental o transferencia a sistemas de medios definidos después de la validación adecuada por parte del usuario.
Almacenamiento y manipulación
Almacene CCM-RG-0010 de 2 a 30 ℃ y proteja la botella de la luz. Mantenga el envase cerrado cuando no esté en uso y aplique técnica aséptica durante la dispensación para preservar el estado filtrado estérilmente del líquido. No use el reactivo si hay contaminación visible, turbidez inesperada, daño del envase o integridad del cierre comprometida. Para obtener resultados constantes, lleve la alícuota requerida a la temperatura de operación definida por el protocolo del laboratorio, minimice la exposición repetida del envase abierto y registre el número de lote, la fecha de apertura y el tiempo de retención en uso definido por el usuario en el registro de lote o de laboratorio.
Calidad y documentación
CellCultureMedia suministra CCM-RG-0010 para uso en investigación, cultivo celular y bioprocesamiento con controles de especificación adecuados para la revisión de compras B2B. Las prácticas de fabricación y liberación están alineadas con ISO, y la documentación específica del lote puede solicitarse a través del canal de documentación de calidad. Los atributos clave de liberación incluyen forma líquida filtrada estérilmente, clasificación libre de origen animal, endotoxinas ≤1 EU/mL y vida útil de 48 meses bajo las condiciones de almacenamiento especificadas. Las unidades estándar de 500 mL están disponibles al precio indicado, con envío mundial gratuito y soporte para previsiones de volumen, compras programadas y precios a granel mediante solicitudes de cotización.
Aspectos destacados de la formulación
Contiene (+)
[+]0.5mM EDTA
No contiene (-)
[-]Phenol Red[-]Ca2+[-]Mg2+
Especificaciones
| Forma | Líquido |
|---|---|
| Clasificación | Libre de origen animal |
| Esterilidad | Filtrado estéril |
| Vida útil | 48 meses |
| Endotoxina | ≤1 EU/mL |
| Condiciones de almacenamiento | 2~30 ℃, protegido de la luz |
| Área de aplicación | Reactivos para cultivo celular |
| Categoría de producto | Reactivos de disociación |
Acerca de este producto
¿Qué líneas celulares admite este producto?
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Más información sobre esto
- Azul de tripano y el ensayo de viabilidad por exclusión de coloranteEl azul de tripano es un colorante diazoico que se emplea al 0.4% (p/v) para separar las células vivas de las muertas mediante exclusión de colorante: una membrana plasmática intacta impide la entrada del colorante cargado, de modo que las células viables permanecen transparentes y refringentes, mientras que las células con la membrana dañada lo incorporan y se tiñen de azul. En la práctica, la suspensión celular se mezcla 1:1 con azul de tripano al 0.4%, se carga en un hemocitómetro o en un contador celular automático y se cuenta en un plazo de 3-5 minutos para obtener a la vez una concentración celular y un porcentaje de viabilidad. Como solo informa sobre la integridad de la membrana, el azul de tripano cuenta las células que ya han muerto: no detecta células apoptóticas ni metabólicamente deterioradas que aún conservan la membrana intacta, por lo que da valores más altos que los ensayos de viabilidad metabólicos o por citometría de flujo.
- Trypsin-EDTAEl Trypsin-EDTA es un reactivo de disociación celular que combina la tripsina, una serina proteasa que corta enlaces peptídicos por el lado C-terminal de los residuos de lisina y arginina en las proteínas de superficie y de la matriz, con el quelante EDTA, que fija los iones calcio y magnesio que necesitan las moléculas de adhesión celular. Se suministra en una solución salina equilibrada sin calcio ni magnesio, lo más habitual al 0.05% de tripsina (0.5 g/L) para líneas celulares de rutina y al 0.25% (2.5 g/L) para células firmemente adheridas y cultivos primarios. El uso típico son 2-5 minutos a 37 °C, seguidos de inmediato por la neutralización con medio con suero o con un inhibidor de tripsina definido.
- Subcultivo celular (pase)El subcultivo celular, también llamado pase, es el traspaso de las células de un cultivo que se aproxima a la confluencia a recipientes nuevos con medio fresco para que el crecimiento pueda continuar. Las células adherentes se despegan primero, normalmente con Trypsin-EDTA al 0.25% o al 0.05% o con un reactivo de disociación no enzimático, y se vuelven a sembrar a una densidad menor fijada por una proporción de división como 1:4; las células en suspensión simplemente se diluyen en medio fresco sin ningún paso de disociación. La mayoría de las líneas celulares adherentes continuas se subcultivan al 70-80% de confluencia, lo que suele significar dos o tres pases por semana.
- Tripsina frente a Accutase: cómo elegir un reactivo de disociación celularLa tripsina es una serina proteasa pancreática que corta los enlaces peptídicos después de lisina y arginina; despega las células deprisa, pero sin discriminar: hay que detenerla con suero o con un inhibidor de tripsina, y corta las proteínas de superficie junto con los contactos de adhesión. Accutase es una mezcla propietaria de enzimas proteolíticas y colagenolíticas de origen invertebrado, suministrada en DPBS sin calcio ni magnesio con 0.5 mM de EDTA; actúa de forma más lenta y suave, no requiere paso de neutralización y conserva más epítopos de superficie. Elija tripsina para el subcultivo rutinario de líneas adherentes robustas, cuando importa la velocidad y las células vuelven directamente al cultivo; elija Accutase cuando las células recogidas son el experimento: citometría de flujo sobre marcadores de superficie, células madre pluripotentes, neuronas primarias o cualquier suspensión de células individuales en la que la viabilidad y el fenotipo deban sobrevivir a la recogida.