0.5 mM EDTA-Lösung, Calcium/Magnesium-frei
0.5 mM EDTA-Lösung, Calcium/Magnesium-frei ist ein steriles, von Bestandteilen tierischen Ursprungs freies Zelldissoziationsreagenz, das ohne phenol red für routinemäßige Zellkultur-Workflows geliefert wird. CCM-RG-0010 wird als gebrauchsfertige Flüssigkeit im 500 mL Format für Labore bereitgestellt, die ein nicht-enzymatisches Chelationsreagenz für die Ablösung adhärenter Zellen, Waschschritte und die Unterstützung von Kulturprozessen benötigen. Es ist bei CellCultureMedia mit kostenlosem weltweitem Versand und Angebotsunterstützung über Angebot anfordern erhältlich.
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- ✓ ISO-orientierte Herstellung
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Übersicht
CCM-RG-0010 ist ein 0.5 mM EDTA Flüssigreagenz, das ohne Calcium-Ionen, Magnesium-Ionen oder phenol red formuliert ist. EDTA unterstützt die Zellablösung durch Chelatbildung divalenter Kationen, die zur Zell-zu-Oberfläche- und Zell-zu-Zell-Adhäsion beitragen. Das Fehlen von Calcium und Magnesium macht die Lösung geeignet für Workflows, in denen kationenabhängige Adhäsion vor dem Passagieren, Ernten, Zählen oder der nachgelagerten Kulturverarbeitung reduziert werden muss. Das phenol red-freie Format ist nützlich, wenn eine Verschleppung von Farbindikatoren in Bildgebung, analytischen Auslesungen oder formulierungsempfindlichen Schritten nicht erwünscht ist.
Dieses 500 mL Reagenz ist als frei von Bestandteilen tierischen Ursprungs und sterilfiltriert eingestuft, mit einer Endotoxinspezifikation von ≤1 EU/mL und einer angegebenen Haltbarkeit von 48 Monaten bei Lagerung gemäß Anweisung. Es ist innerhalb der Zellkulturreagenzien für Beschaffungsprogramme positioniert, die definierte Dissoziationsreagenzien mit klarer Dokumentation, Chargenrückverfolgbarkeit und vorhersehbarer Versorgung benötigen. Das Produkt wird als gebrauchsfertige Flüssigkeit geliefert, reduziert die interne Vorbereitungszeit und hilft Teams, Dissoziationsbedingungen in R&D-, Prozessentwicklungs- und routinemäßigen Produktionsunterstützungsumgebungen zu standardisieren.
Anwendungen
- Unterstützung der nicht-enzymatischen Dissoziation für adhärente Säugerzellkulturen, wenn ein milder Chelationsschritt gegenüber proteasebasierter Ablösung bevorzugt wird.
- Spül- oder Inkubationsschritt vor dem Passagieren für Monolayer-Kulturen, die vor Ablösung oder Ernte calcium- und magnesiumfreie Bedingungen erfordern.
- Phenol red-freie Handhabungs-Workflows, bei denen optische Assays, Bildgebung oder Medienformulierungsstudien von reduzierter Verschleppung von Farbindikatoren profitieren.
- Prozessentwicklung in der Zellkultur, bei der Hilfsreagenzien ohne Bestandteile tierischen Ursprungs für Materialkontrolle, Lieferantenqualifizierung oder Scale-up-Planung spezifiziert sind.
- Vorbereitung von Zellen für Zählung, Wiederaussaat, experimentellen Aufbau oder Transfer in definierte Mediensysteme nach entsprechender Validierung durch den Anwender.
Lagerung und Handhabung
CCM-RG-0010 bei 2 bis 30 ℃ lagern und die Flasche vor Licht schützen. Den Behälter geschlossen halten, wenn er nicht verwendet wird, und beim Dosieren aseptische Technik anwenden, um den sterilfiltrierten Status der Flüssigkeit zu erhalten. Das Reagenz nicht verwenden, wenn sichtbare Kontamination, unerwartete Trübung, Behälterschäden oder beeinträchtigte Verschlussintegrität vorliegen. Für konsistente Ergebnisse das benötigte Aliquot auf die durch das Laborprotokoll definierte Betriebstemperatur bringen, wiederholte Exposition offener Behälter minimieren und Chargennummer, Öffnungsdatum sowie anwenderdefinierte In-use-Haltezeit im Chargen- oder Laborprotokoll aufzeichnen.
Qualität und Dokumentation
CellCultureMedia liefert CCM-RG-0010 für Forschungs-, Zellkultur- und Bioprocessing-Anwendungen mit Spezifikationskontrollen, die für die B2B-Beschaffungsprüfung geeignet sind. Herstellungs- und Freigabepraktiken sind ISO-ausgerichtet, und chargenspezifische Dokumentation kann über den Kanal Qualitätsdokumentation angefordert werden. Zu den wichtigsten Freigabeattributen gehören sterilfiltrierte Flüssigform, Einstufung als frei von Bestandteilen tierischen Ursprungs, Endotoxin ≤1 EU/mL und 48-monatige Haltbarkeit unter den spezifizierten Lagerbedingungen. Standard-500 mL-Einheiten sind zum angegebenen Preis erhältlich, mit kostenlosem weltweitem Versand und Unterstützung für Volumenprognosen, planmäßige Beschaffung und Bulk-Preise über Angebotsanfragen.
Highlights der Formulierung
Enthält (+)
[+]0.5mM EDTA
Enthält nicht (-)
[-]Phenol Red[-]Ca2+[-]Mg2+
Spezifikationen
| Form | Flüssig |
|---|---|
| Klassifizierung | Frei von tierischen Bestandteilen |
| Sterilität | Sterilfiltriert |
| Haltbarkeit | 48 Monate |
| Endotoxin | ≤1 EU/mL |
| Lagerbedingungen | 2~30 ℃, lichtgeschützt |
| Anwendungsbereich | Zellkulturreagenzien |
| Produktkategorie | Dissoziationsreagenzien |
Über dieses Produkt
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- Trypanblau und der Farbstoffausschlusstest zur ViabilitätsbestimmungTrypanblau ist ein Diazofarbstoff, der als 0.4% (w/v) Lösung eingesetzt wird, um lebende von toten Zellen über den Farbstoffausschluss zu unterscheiden: Eine intakte Plasmamembran hält den geladenen Farbstoff draußen, sodass lebensfähige Zellen klar und lichtbrechend bleiben, während Zellen mit geschädigter Membran den Farbstoff aufnehmen und sich blau anfärben. In der Praxis wird die Zellsuspension 1:1 mit 0.4% Trypanblau gemischt, in eine Zählkammer oder ein automatisches Zellzählgerät gegeben und innerhalb von 3-5 Minuten ausgezählt, was gleichzeitig eine Zellkonzentration und eine prozentuale Viabilität liefert. Da nur die Membranintegrität erfasst wird, zählt Trypanblau Zellen, die bereits gestorben sind — apoptotische oder metabolisch versagende Zellen mit noch intakter Membran erkennt es nicht, sodass die Werte im Vergleich zu metabolischen oder durchflusszytometrischen Viabilitätstests zu hoch ausfallen.
- Trypsin-EDTATrypsin-EDTA ist ein Reagenz zur Zelldissoziation, das die Serinprotease Trypsin — sie spaltet Peptidbindungen C-terminal von Lysin- und Argininresten in Zelloberflächen- und Matrixproteinen — mit dem Komplexbildner EDTA kombiniert, der die von Zelladhäsionsmolekülen benötigten Calcium- und Magnesiumionen bindet. Geliefert wird es in einer Calcium- und Magnesium-freien ausgewogenen Salzlösung, meist mit 0.05% Trypsin (0.5 g/L) für gängige Zelllinien und 0.25% (2.5 g/L) für fest anhaftende Zellen und Primärkulturen. Üblich sind 2-5 Minuten bei 37 °C, gefolgt von der sofortigen Neutralisation mit serumhaltigem Medium oder einem definierten Trypsininhibitor.
- Subkultivierung von Zellen (Passagieren)Die Subkultivierung von Zellen, auch Passagieren genannt, ist die Überführung von Zellen aus einer Kultur, die sich der Konfluenz nähert, in frische Gefäße mit frischem Medium, damit das Wachstum weitergehen kann. Adhärente Zellen werden zuerst abgelöst, meist mit 0.25% oder 0.05% Trypsin-EDTA oder einem nicht enzymatischen Dissoziationsreagenz, und dann in geringerer Dichte neu ausgesät, festgelegt durch ein Teilungsverhältnis wie 1:4; Suspensionszellen werden ohne jeden Dissoziationsschritt einfach in frisches Medium verdünnt. Die meisten kontinuierlichen adhärenten Zelllinien werden bei 70-80% Konfluenz subkultiviert, was in der Regel zwei bis drei Passagen pro Woche bedeutet.
- Trypsin vs. Accutase: Das richtige Zelldissoziationsreagenz wählenTrypsin ist eine Serinprotease aus dem Pankreas, die Peptidbindungen nach Lysin und Arginin spaltet. Sie löst Zellen schnell, aber unselektiv ab, muss mit Serum oder einem Trypsininhibitor gestoppt werden und spaltet neben den Adhäsionskontakten auch Oberflächenproteine. Accutase ist eine proprietäre Mischung proteolytischer und kollagenolytischer Enzyme aus einer wirbellosen Quelle, geliefert in calcium- und magnesiumfreiem DPBS mit 0.5 mM EDTA; sie wirkt langsamer und schonender, benötigt keinen Neutralisationsschritt und erhält mehr Oberflächenepitope. Wählen Sie Trypsin für das routinemäßige Passagieren robuster adhärenter Linien, wenn es auf Tempo ankommt und die Zellen direkt zurück in Kultur gehen; wählen Sie Accutase, wenn die geernteten Zellen selbst das Experiment sind — Durchflusszytometrie auf Oberflächenmarker, pluripotente Stammzellen, primäre Neurone oder jede Einzelzellsuspension, in der Lebensfähigkeit und Phänotyp die Ernte überstehen müssen.
